環(huán)境保持

相信很多新手朋友都會遇到這種情況，自己培養(yǎng)的細胞養(yǎng)的好好的，突然有一天細胞培養(yǎng)基渾濁了、變黃、飄著一些霉菌團或者顯微鏡下全是樹枝樣的霉菌菌絲，起初還只是一兩個培養(yǎng)瓶有這種情況，過段時間就大面積都出現(xiàn)這種情況了。出現(xiàn)以上情況的時候，很多剛開始接觸細胞培養(yǎng)的人都不知道怎么污染的，更不知道如何處理。那么接下來，小編就帶你們看看怎么從環(huán)境上降低細胞被污染的概率。

首先我們要知道，造成細胞污染的污染物不是憑空產(chǎn)生的，而是環(huán)境或者人為帶入的，那么我們就要從環(huán)境和個人方面入手。接下來，就讓我們詳細的了解下具體需要注意哪些事項吧。

一、 細胞室設計

細胞室設計可別小看這點，很多實驗室長期出現(xiàn)污染都與這個有很大關系。

1. 細胞室應設計合理的通風、緩沖區(qū)域。

細胞室的空氣要保持清潔，需要對流入的空氣進行過濾，防止外界污染通過空氣傳播。人員進入細胞室，需要經(jīng)過緩沖室，緩沖室的作用就是避免開門進出時外界的空氣直接與細胞室內流通，同時還有另外一個功能，就是人員穿戴實驗服、防具的可以在這里進行，避免人體身上灰塵、皮屑等直接進入細胞室。

2. 細胞室位置避免陽光直射、隔離水源、通風良好。

避免陽光直射，可以直接降低細胞室夏天的空調費用，這個應該沒有人有疑問。不過還有另外一個重要原因，我們目前培養(yǎng)的細胞大部分都是37度培養(yǎng)的，所以氣溫需要維持37度以下，甚至部分國產(chǎn)培養(yǎng)箱需要保持室溫30度以下才能正常工作。隔離水源可以避免水池里滋生的各種細菌、真菌等，降低實驗室污染概率，切忌圖方便將水源引入細胞室，否則管理不善的話很容易出現(xiàn)各種污染的情況。細胞室需要經(jīng)常保持通風，通風可以降低空氣濕度，尤其是南方梅雨季節(jié)，降低空氣濕度可以減少霉菌滋生的情況。

3. 細胞室超凈臺、生物安全柜應擺放合理。

超凈臺、安全柜都是通過過濾空氣來防止污染的，所以彼此之間應留出一定空間，避免出現(xiàn)互相吹風，影響各自工作的情況。

二、 個人裝備

個人裝備可以有效的防止人體自身攜帶的污染物污染細胞，同時也能為實驗者提供可靠的防護。

1. 換鞋，穿戴實驗服、手套、口罩是進入細胞室必須的。

細胞室是潔凈的環(huán)境，而人體自身會攜帶諸多污染物進入實驗室。換鞋，穿戴實驗服、手套、口罩可以很大程度上避免沾染的泥土、灰塵、皮屑、毛發(fā)、口腔細菌、支原體所致的污染。

2. 實驗服、手套、口罩可以給實驗者提供防護。

有部分細胞是會表達一些病毒的，而且很多細胞都是人體瘤細胞，相信實驗者都不想直接接觸這些細胞，那么合理使用個人防護道具可以避免直接接觸，降低實驗者心理壓力。

三、環(huán)境維持

有合理設計的實驗室，合理使用個人裝備還不夠，還需要定期對環(huán)境進行維護，掃除漏網(wǎng)之魚。

1. 細胞室應定期紫外消毒。

細胞室內應在固定位置安裝紫外殺菌燈，通過紫外、臭氧雙重作用殺滅可能存在的污染物，保持環(huán)境潔凈。最好有定時開關，每天晚上人離開實驗室后，對實驗室進行1-2h的紫外殺菌。

2. 培養(yǎng)箱應定期清洗消毒。

培養(yǎng)箱是至關重要的一環(huán)，一旦污染，不加控制的話，勢必造成大面積污染的情況。培養(yǎng)箱建議1-2周換水一次，2-3個月進行一次清洗、整體消毒。如果平時污染比較嚴重的話，可以縮短消毒周期，避免長時間使用導致污染累積爆發(fā)。

3. 超凈臺、安全柜每次使用后應擦干凈臺面、紫外照射。

使用后用75%酒精棉擦干凈臺面，可以保持臺面清潔，美觀。使用超凈臺前，一定要紫外殺菌1-2h方可開始實驗。

4. 細胞室地面應定期用消毒液拖地。

地面是污染物最嚴重的地方，需要經(jīng)常用84消毒液拖地，保持地面清潔。

5. 各種臺面、冰箱內部定期清洗消毒。

這些地方也是容易藏污納垢的地方，一定要經(jīng)常用75%酒精擦洗干凈，保持清潔。

好了，今天分享的細胞培養(yǎng)經(jīng)驗就到此為止了，我們下期再見。

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